什么是流式細(xì)胞儀？

流式細(xì)胞儀是一種用于執(zhí)行稱為流式細(xì)胞術(shù)的測量方法的設(shè)備。

該測量涉及將激光束照射到流動(dòng)液體樣品中的細(xì)胞上，檢測細(xì)胞發(fā)出的散射光和熒光，并測量細(xì)胞大小、數(shù)量以及細(xì)胞內(nèi)和表面抗原等特征。

流式細(xì)胞儀與熒光顯微鏡相比具有優(yōu)勢，例如能夠同時(shí)定量多個(gè)測量項(xiàng)目，分析速度快。另一方面，流式細(xì)胞儀不適合觀察細(xì)胞的形態(tài)特征。

流式細(xì)胞儀的使用

流式細(xì)胞儀廣泛應(yīng)用于涉及細(xì)胞、臨床測試和治療的生物和醫(yī)學(xué)研究。可以測量多種類型的細(xì)胞。我們分析外周血白細(xì)胞以進(jìn)行疾病診斷，并分析稀有細(xì)胞，例如培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞、成體干細(xì)胞和腫瘤起始細(xì)胞，以對(duì)其進(jìn)行表征。

其他測量對(duì)象包括微生物、浮游生物等海洋生物、精子、酵母和乳膠珠。

流式細(xì)胞儀原理

流式細(xì)胞儀主要由流路系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)和電氣系統(tǒng)三部分組成。流道系統(tǒng)具有吸入樣品并將其流入流通池的功能，流通池被來自光學(xué)系統(tǒng)的激光照射，該光學(xué)系統(tǒng)由光源、透鏡、濾光片和產(chǎn)生光電流的檢測器組成。

然后，該系統(tǒng)檢測細(xì)胞發(fā)出的熒光，并使用電氣系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行分析。流路系統(tǒng)由管道、閥門和泵組成，用于將樣品中漂浮的熒光標(biāo)記細(xì)胞排列在一條線上進(jìn)行分析。

當(dāng)激光穿過細(xì)胞的被稱為詢問點(diǎn)的部分時(shí)，光被散射，同時(shí)通過激發(fā)與細(xì)胞結(jié)合的熒光染料而發(fā)射熒光，并且該散射光和熒光被裝置檢測。它作為一個(gè)信號(hào)。散射光有兩種類型：前向散射光信號(hào)（FS）和側(cè)向散射光信號(hào)（SS）。

使用不同的檢測器檢測FS和SS，F(xiàn)S反映細(xì)胞大小，SS反映細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)。檢測到的信號(hào)在電子系統(tǒng)中轉(zhuǎn)換成數(shù)據(jù)，最終可以由軟件解釋。

其他流式細(xì)胞儀信息

1.分析儀和細(xì)胞分選儀

流式細(xì)胞儀分為兩種類型：細(xì)胞分析儀和細(xì)胞分選儀。細(xì)胞分析儀是分析細(xì)胞的設(shè)備。包裹在鞘液中的樣品液中的細(xì)胞通過流通池一一排列并流過檢測部分。在那里照射激光，通過檢測光散射和熒光來分析細(xì)胞。

細(xì)胞分析儀專注于分析，因此簡單易用。除了細(xì)胞分析之外，細(xì)胞分選儀還可以分選出所需的細(xì)胞。除了分析細(xì)胞結(jié)構(gòu)、大小和比例之外，還可以檢查細(xì)胞分布并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行高速分類。

待分選的目標(biāo)細(xì)胞被賦予正電荷或負(fù)電荷，并形成液滴。只有帶電的目標(biāo)細(xì)胞液滴被施加電壓的偏光板轉(zhuǎn)移并收集到試管或微管中。細(xì)胞分選儀的操作比細(xì)胞分析儀更復(fù)雜，并且需要更多的技能。

2. 流式細(xì)胞儀用抗體

流式細(xì)胞術(shù)中使用的細(xì)胞檢測抗體包括多克隆抗體和單克隆抗體。多克隆抗體是從用抗原免疫動(dòng)物后收集的血清中純化的抗體。該抗體是識(shí)別并結(jié)合多個(gè)表位（抗體結(jié)合部分）的抗體混合物。

為了生產(chǎn)單克隆抗體，需要給動(dòng)物提供抗原并進(jìn)行免疫，然后攜帶抗體的 B 細(xì)胞與骨髓瘤（癌細(xì)胞）融合。從所得雜交瘤中分泌的抗體是單克隆抗體。該抗體僅識(shí)別一個(gè)表位。

從提高實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和目標(biāo)物質(zhì)（抗原）檢測的特異性的角度來看，流式細(xì)胞術(shù)用的抗體大多是單克隆抗體。